微柱凝胶卡法(
血型卡流水线生产加工)是一种广泛应用于血型鉴定、交叉配合、不规则抗体筛选和鉴定及直接、间接抗人球蛋白实验中的检验方法,具有操作简便、准确、灵敏度高、标本用量少、结果可长期保存、可标准化等优点。
近年来,卡式微柱凝胶检验法已在全国各级医院中,普遍运用,用来作血型鉴定的检验方法,相对于从前国内各级医院用手工操作作血型鉴定来说,卡式法结果准确,操作简单,试剂用量小;环境污染因此下降。我院自2005年7月开始用卡式法来作血型鉴定的检测工作。并对800名住院病人作了卡式法与手工操作的平行实验,并对结果进行了比较及分析。
一、材料和方法
A仪器:
孵育器:Diana(戴安娜)lncubador专用孵育器。
离心机: Diannafuge专用离心机。
B试剂:1、卡式法试剂:DG Gel ABO-CDE卡,A1红细胞、B红细胞、O红细胞。2、手工试剂:抗A、抗B血清为长春生物制品研究所生产。3、标本来源:某医院2005年10月至2006年7月外科住院病人800名,其中男522人,女278名。年龄11~86岁。抽取左肘静脉2ml,肝素抗凝,同时分别用卡式法和手工操型作鉴定血型。 4、方法:a卡式检测法 按戴安娜公司卡氏血型鉴定手册进行。取DG Gel ABO-CDE血型鉴定卡一个,标记病人的姓名 病历号等,撕去卡上的锡纸膜,在A、B、D、C、E五孔各加入病人红细胞悬液50ul,在ctl、A1、B孔分别加入O、A1、B红细胞,离心后按说明书提示标准判读结果。b手工操作 按《全国临床检验操作规程》[1] 规定,正向定型和反向定型用试管法进行。
二、结果
将上述两种方法的鉴定结果进行比较,凡正反定型和卡式检测法检验相关血型不符合者,将血液红细胞用生理盐水洗涤3次,再用两种方法重复测定,作正确率比较。
三、讨论
卡式微柱凝胶法是抗原,抗体反应和凝胶分子筛技术相结合的检测法。它是通过葡聚糖凝胶的浓度来控制分子筛孔径大小,使分子筛只让游离分子通过,从而达到分离凝聚红细胞和游离红细胞的目的。戴安娜公司生产的ABO/CDE卡既可以应用于ABO血型系统正反定型的同时检验,又可以进行Rh血型系统中抗C、抗D、抗E的检验,符合《全国临床检验操作规抗程》对血型鉴定要求,且操作简单,敏感性 特异性都高于手工正定型法。且正反定型相结合,弥补了正定型的不足。
卡式法的优点是 采用标准化定量工作,减少了操作人员的随意性,且重复性好。由于用了 凝胶分子筛技术,将凝集的,游离的红细胞分开,使结果一目了然。避免了操作上的主观影响[2],所要标本量少,操作容易,省去了繁锁的洗涤过程,不再耽心抗人球蛋白抗体被中和,而产生假阳性。也便于保存,一般而言,在冰箱中可保存半年至一年。还可进行拍照供永久记录,以备发生血型鉴定错误时查对原始资料。塑料卡易销毁,不污染环境。
总之,卡式微柱凝胶法即使对无经验的操作者而言,结果判读,要比试管 法更可靠,加上操作简单,省时,用试剂少,成本低,污染环境少,是一个值得推广的血型鉴定好方法。
广州迈志医疗自动化设备专业生产血型卡生产设备(微柱凝胶卡)等成套生产流水线
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