微柱凝胶卡交叉配血试验常见问题及处理
微柱凝胶卡交叉配血试验的原理:在微柱凝胶介质中,红细胞抗原与相应抗体结合,利用凝胶的空间位阻,经低速离心,凝集的红细胞悬浮在凝胶上层,而未和抗体结合的红细胞则沉于凝胶底部(管底尖部)。
微柱凝胶卡交叉配血试验的优点:微柱凝胶实验(又名微柱凝胶血型卡法)有结果清楚明确、结果稳定可保存、灵敏度高、特异性强、可标准化操作、自动化程度高、可检出IgG抗体、标本用量少、降低错误发生率的优点。微柱凝胶卡交叉配血试验常见问题:
1主侧不凝集,次侧凝集
1.1微柱凝胶卡交叉配血试验如果主侧不凝集,而次侧凝集,原因有:①患者的红细胞已经包被了抗体(自身抗体,直接抗人球蛋白试验即DAT阳性反应)。最常见的原因是患者有免疫系统疾病、肿瘤以及骨科患者。②供血者血浆中存在针对患者红细胞的抗体。③患者与供血者的ABO血型不合。
1.2处理
1.2.1患者红细胞直接抗人球蛋白试验:患者05%红细胞悬液50ul加入合血卡主侧或次侧,立即离心5min(900rpm2min;1500rpm3min。程序已设置好。),取出肉眼判定结果。如果为阳性结果,则说明患者自身红细胞问题,即患者红细胞已被致敏,此袋血可以发出,但报告写清楚:主侧不凝集,次侧凝集,患者红细胞直接抗人球蛋白试验阳性,请缓慢输注。
1.2.2如果患者红细胞直接抗人球蛋白试验为阴性结果,则查找献血员血浆中是否存在不完全抗体。用献血员血浆作不完全抗体筛查试验:08%标准红细胞悬液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ各50ul(1滴)加入相应凝胶管中,再加献血员血浆50ul,37℃孵育15min,离心5min(900rpm2min;1500rpm3min。程序已设置好。),取出肉眼判断结果。如果为阳性结果,则说明献血员血浆中存在不完全抗体,此袋血不能发出,必须换一袋血再重新合血
1.2.3如果还查找不出原因,则请临床重新抽取血液标本,用新标本重新合血。
2主侧凝集,次侧不凝集
2.1微柱凝胶卡交叉配血试验如果主侧凝集,次侧不凝集,原因有:①患者或供血者ABO定型不正确,或二者的ABO血型不配合。②某些亚型的特异性非常强。③患者血清中存在同种抗体,与供血者红细胞上的相应抗原发生了反应。④供血者红细胞上已经包被了抗体。⑤患者血清不正常,患者刚输注大分子药物如右旋糖酐。
2.2处理①重新鉴定血型,如属血型错误,则重新用同型血合血。②如属亚型,则此袋血不可以发出,必须换一袋血重新合血。③如果患者刚输注大分子药物如右旋糖酐,则立即停止输注大分子药物,2h后重新抽取血液标本,重新合血。
3主次侧均凝集
3.1微柱凝胶卡交叉配血试验如果主次侧均凝集,原因主要是ABO血型的错误。
注意事项:①抗人球蛋白凝胶合血卡必须标注患者姓名和献血员血袋号(后4位),一卡可以合三袋血。②微柱凝胶卡的准备:合血前首先观察微柱凝胶卡的外观如有干胶、杂质、气泡不可使用,然后用专用离心机离心3~4min。③红细胞悬液浓度不可太浓或太淡,应以0.5%~0.8%为宜。④冬天可将生理盐水37℃孵育后配红细胞悬液,遇疑难情况,可用温盐水洗涤红细胞后再作血型鉴定和合血。⑤血清、红细胞悬液应加至卡反应室中。⑥可疑凝集时,则再离心5min,再观察结果。⑦血清或血浆标本必须充分去纤维蛋白,否则标本中纤维蛋白在微柱凝胶中析出,阻碍阴性红细胞沉降,呈假阳性反应或出现混合凝集。若血浆标本上清液有絮状物或颗粒,可将上清液再离心使纤维蛋白下沉。配红细胞悬液时将吸头申入管底部,避免吸入纤维蛋白。供血者血液标本必须离心,合血管的血浆与红细胞交界处含有较多纤维蛋白,应把交界处剪掉。⑧某些疾病、药物等可导致交叉配血不合,应加以区别。⑨异常血清蛋白及细菌可影响结果。⑩微柱凝胶卡应放在18~25℃储存,应注意防重物压、防高温。
总之,微柱凝胶卡交叉配血试验中发现有不配合(一侧凝集或两侧均凝集),首先应考虑受血者和供血者的ABO定型是否有错,必须重新鉴定血型,包括RH血型,必须做不规则抗体筛查试验。其次,应注意有无特异性同种抗体、特异性未知的同种抗体存在。患者的血清若在室温、37℃或抗人球蛋白中凝集所有其他红细胞,造成交叉配血试验困难时,应及时请示上级主管或主任。必要时请求上级血液中心指导和解决问题。
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