正定型血型检测卡标准操作程序
正定型血型检测卡采用特定缓冲液和抗体溶液悬浮的凝胶颗粒作为微柱的填充物,将凝胶分子筛过滤技术、离心技术和血型血清学的抗原抗体反应结合在一起。当抗原抗体反应时,凝集的红细胞在离心力的作用下不能通过凝胶微柱而留在凝胶微柱上层或分散在凝胶微柱中,呈现阳性反应;而抗原抗体没有反应时,未凝集的红细胞在离心力的作用下可通过凝胶微柱而沉积在孔底,呈现阴性反应。
一、检验原理
利用微柱凝胶过筛检测原理。待检红细胞(RBC)如果与凝胶中的单克隆 IgM 抗 A、抗 B、抗 D 试剂发生特异性凝集反应,在一定的离心力作用下,凝集的红细胞被排阻在具有三维空间网状结构的凝胶表层或凝胶颗粒间隙之中,判为阳性结果,表示待检红细胞含有相应的血型抗原;RBC 全部沉积于凝胶孔腔底部,判为阴性结果,表示待测待检红细胞不含相应的抗原。供医院临床对 ABO 血型系统的 A、B 抗原,Rh 血型系统的 D 抗原的检测。
二、检测卡主要组成成份
A、B、O、Control 微柱管分别各含凝胶 65%,A 管含 35%单克隆 IgM 抗 A(效价)≥128)、B 管含 35%单克隆 IgM 抗 B(效价≥128)、D 管含 35%单克隆 IgM 抗 D(效价≥64)、Control管含 35%生理盐水。检测卡储存条件 2~25℃,有效期为一年。
三、 准备工作 1.微柱凝胶试剂卡的准备:观察外观,如有干胶、杂质、气 泡不可使用,之后将卡放置室温(18-25℃)平衡,再用专用离心机离心,2000rpm 10 分钟。 2. 检测标本的准备: 红细胞悬液的制备:取被检者压积红细胞 10 微升,加入 1 毫升红细胞稀释液(95%生理盐水)。配置好的红细胞悬液外观应为均匀淡红色,无絮状物和血块。
四、操作步骤 1.将准备好的 ABO.RhD 血型定型试剂卡做好标记 2.将待检者 0.8%-1%红细胞悬液分别加入第 1 至第 4 管中,每管 50ul 3. 即刻使用专用离心机离心,1000rpm2 分钟,1800rpm3 分钟,取出肉眼判定结果。
五、 注意事项
1. 检测标本必须为抗凝血。
2. 红细胞标本一定不能被细菌污染,否则出现假阳性反应。尽可能应用当日采集的新鲜血做本试验。
3. 如在微柱凝胶管中出现溶血现象,强烈提示为红细胞抗原抗体阳性反应,也不排除其他原因所致溶血,故对此标本一定认真分析,并向上级主管技术人员报告并讨论。
4. 若结果为±或 1+需进一步分析,可能为亚型或弱化抗原。
5. 红细胞悬液的浓度控制在 0.8%--1%之间,否则可能出现漏检或混合凝集。
6. 每日实验前,先取出微柱凝胶卡放置一段时间至室温,以防冷凝集。
7. 试剂卡应放在 18-25℃储存,如若长期放在 4℃冰箱,建议每 1-2 个月取出,用专用离心机离心一次,以防止干胶或产生气泡。
以上就是正定型血型检测卡在操作过程中的使用规范及需要注意的事项。广州迈志医疗自动化设备有限公司专门从事血型检测卡生产线自动化设备制造,有多年非标设备设计制造经验,如有设备技术疑问欢迎来电咨询,黎经理13825090805,我们可按照客户标准设计定制。
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